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讓細(xì)胞活躍的訣竅你知道嗎?

點(diǎn)擊次數(shù):1025 發(fā)布時(shí)間:2019/6/24
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                                                        讓細(xì)胞活躍的訣竅你知道嗎?

         細(xì)胞可是許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主角。如果細(xì)胞心情不好,那么實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也不會(huì)好到哪兒去。如何讓細(xì)胞快樂?細(xì)胞快樂的訣竅,將為你解答,一切

1. 確保所有實(shí)驗(yàn)室材料都無菌
交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。即使是*輕微的污染,也可能毀了幾個(gè)星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕,真菌極易生長(zhǎng),因此必須注意定期清潔。此外,在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前,應(yīng)用酒精擦拭干凈,以避免污染。

2. 小心處理您的培養(yǎng)物
細(xì)胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強(qiáng)調(diào)也不為過。劇烈搖晃,或連續(xù)的溫度波動(dòng)可能會(huì)對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的,溫度均一,且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外,盡量避免一次處理多個(gè)細(xì)胞系,因?yàn)樗赡軙?huì)影響細(xì)胞的基因型和表型。您還應(yīng)定期完成STR圖譜分析,以確認(rèn)細(xì)胞系的身份。

3. 在使用前正確解凍細(xì)胞
盡管解凍看起來是個(gè)簡(jiǎn)單的步驟,但必須操作得當(dāng),以免傷害細(xì)胞。長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫條件下會(huì)使細(xì)胞無法鋪板。因此,凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培養(yǎng)基稀釋,以避免DMSO造成直接傷害。

4. 使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)過程共有3個(gè)階段:停滯期、對(duì)數(shù)期和平臺(tái)期,分別代表了低細(xì)胞生長(zhǎng)、高細(xì)胞生長(zhǎng)和無細(xì)胞生長(zhǎng)。*有活力的細(xì)胞是健康的,快速分裂的,在對(duì)數(shù)期以70-80%的匯合度存在。

5. 在傳代之前不要讓細(xì)胞*匯合
匯合度是指貼壁細(xì)胞占據(jù)培養(yǎng)瓶表面積的比例。*匯合意味著表面都被貼壁細(xì)胞覆蓋。一定要避免這種狀態(tài),因?yàn)樗馕吨?xì)胞不能繼續(xù)生長(zhǎng)。不過,當(dāng)務(wù)之急是使用活躍生長(zhǎng)的細(xì)胞。

6. 選擇*佳的培養(yǎng)基開發(fā)策略
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基是控制產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和成本的*重要因素。必須針對(duì)每種培養(yǎng)物來定制培養(yǎng)基,以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在決定以哪種方式來開發(fā)您的培養(yǎng)基時(shí),您有幾個(gè)選擇。您可以購買現(xiàn)成的,自己開發(fā),也可以與另一家公司合作開發(fā)特定的培養(yǎng)基。在這個(gè)過程中,您需要考慮時(shí)間和成本等因素。

 
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